葡聚糖凝膠是一種珠狀的凝膠,含有大量的羥基,很容易在水中和電解質(zhì)溶液中溶脹。親水基質(zhì)使其非特異性吸附最小化,并在生物分子分離期間得到較高的回收率。葡聚糖凝膠G-100通常為白色珠?;蚍勰?,屬親水性凝膠。性穩(wěn)定,不溶于水、弱酸和堿溶液,遇強酸能使糖苷鍵分解。其工作原理:
葡聚糖凝膠G-100利用分子篩作用,根據(jù)被分離物質(zhì)的分子大小不同來進行分離。大于凝膠孔徑的大分子被阻于凝膠相外,沿著凝膠顆粒之間的間隙移動,下移速度最快,故最先洗脫下來;中分子物質(zhì)部分進入凝膠內(nèi)部,洗脫速度為其次;而小分子物質(zhì)因全部進入凝膠,受到阻力*大,故*后被洗脫下來。
應(yīng)用:葡聚糖凝膠G-100主要用于多肽分離、脫鹽、清洗生物提取液、分子量測定等科研實驗。
使用前準(zhǔn)備:葡聚糖凝膠G-100以干粉形式存在,使用前必須溶脹。通常在過量去離子水或緩沖液中,室溫條件下膨脹24小時,或用熱水膨脹1小時。溶脹過程中,如果上層有漂浮物,應(yīng)去除。
使用注意事項:在使用過程中,避免使用高濃度的強酸強堿,酸和堿的濃度應(yīng)低于0.15摩爾。堿會使流速變慢。不同的樣品,吸附和洗脫方法不相同,可以根據(jù)相關(guān)的文獻進行。